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适用专业:生物工程
适用年级:大学
论文编号:206536
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毕业论文-产木葡聚糖酶菌株的筛选、鉴定及发酵初步研究,共27页,10804字
摘要
为筛选对木葡聚糖具有降解作用的细菌,从富含纤维质原料的环境中采集样品及从实验室菌种库中选取2000余株菌种,利用从南瓜中碱提的粗木葡聚糖作为唯一碳源配制培养基进行初筛,再以经过雷马素亮蓝染色的纯度97%以上的木葡聚糖作为唯一碳源配制培养基进行复筛,观察是否产生透明圈。将有透明圈产生的菌种进行摇床培养,并对其发酵液进行酶活测定,进而筛选出20株目的菌种,经过16SrDNA序列测定,确定其种属名。从20株目的菌种中确定1株酶活较高的菌种,即地衣芽孢杆菌(Bacillus lichenifoemis),对其进行初步发酵培养基单因素实验,确定酶活较高时影响因素为:初始pH6.0,蛋白胨用量与酵母膏用量比1.5:1,木糖浓度0.3%,NaCl浓度0.2%。在单因素实验基础上进行正交实验,得到最优组合为:pH5、NaCl浓度0.2%、蛋白胨用量与酵母膏用量比1.5:1。
关键词:木葡聚糖;木葡聚糖酶;酶活;
摘要 1
Abstract 2
目录 1
1 绪论 3
1.1 研究背景和意义 3
1.1.1 国内外研究现状 3
1.1.2 本研究的意义 3
1.2 本课题主要任务 4
1.3 本课题研究内容 4
2 材料与方法 5
2.1 土样的采集 5
2.2 南瓜中粗木葡聚糖的制备 5
2.2.1 南瓜的预处理 5
2.2.2 南瓜的水提 5
2.2.3 南瓜中粗木葡聚糖的提取工艺 5
2.3 筛菌培养基 6
2.3.1 初筛培养基 6
2.3.2 复筛培养基 6
2.3.3 产木葡聚糖酶培养基 7
2.4 培养条件 7
2.4.1 菌种平板培养. 7
2.4.2 一级种子培养 7
2.4.3 摇瓶培养 7
2.5 实验方法 7
2.5.1 土壤中菌种的初筛. 7
2.5.2 土壤中菌种的复筛 7
2.5.3 实验室菌种库中菌种的筛选 8
2.5.4 菌种的酶活测定 8
2.5.5 菌种的测序鉴定 9
2.5.6 菌种的发酵初步研究 11
2.5.7 正交实验 13
3 结果与讨论 15
3.1 结果 15
3.1.1 初筛 15
3.1.2 复筛 15
3.1.3 菌种的测序鉴定 16
3.1.4 菌种的发酵初步研究 17
3.1.5 正交实验 20
3.2 讨论 21
4 结论 23
致谢 24
参考文献 25
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